在ELISA試劑盒實(shí)驗操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的，無論是對實(shí)驗的硬件條件還是對實(shí)驗的操作人員的技術(shù)要求，都是如此。下面所提到的就是一些在進(jìn)行ELISA實(shí)驗時所要注意15個問題:

1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定，但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
3、要在實(shí)驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4、實(shí)驗時，要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
6、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
7、將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
8、溫浴時，要用封板膜封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
9、洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1-2分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
10、檢測前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
11、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
12、待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。
13、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
14、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
15、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。

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